在基因功能研究与药物开发领域,精准解析基因表达调控机制是探索生命奥秘的重要一步。为了满足科研工作者对高效、可靠检测工具的需求,泛亚电竞正式推出双荧光素酶报告基因检测服务!通过国际领先的技术平台与标准化操作流程,我们帮助您快速验证启动子活性、miRNA靶向作用、信号通路调控等关键问题,让基因调控研究变得更加精准、高效!
反应原理
双荧光素酶报告基因检测系统是利用荧光素(luciferin)和腔肠素(coelenterazine)作为底物,测定萤火虫荧光素酶(firefly luciferase)和海肾荧光素酶活性的一种双报告系统。萤火虫荧光素酶作为报告基因,催化luciferin氧化成oxyluciferin,并在此过程中发出生物荧光;海肾荧光素酶作为内参基因,催化coelenterazine氧化成coelenteramide,同样会发出生物荧光。通过荧光测定仪检测反应过程中的生物荧光或使用酶标仪来监测荧光素酶活性的变化。
为何选择双荧光素酶报告基因检测?
双荧光素酶系统(Firefly & Renilla Luciferase)是基因调控研究的“黄金搭档”。通过双信号校正技术,这一系统能够有效消除实验误差(如细胞数量、转染效率等干扰),显著提升数据的稳定性和敏感度。
适用场景与服务优势
我们的双荧光素酶报告基因检测服务可广泛应用于基础研究和药物开发项目,具有流程清晰、操作简便的优势。三步即可轻松完成实验方案设计、序列合成、质粒构建、转染及报告基因检测,最终结果会提供质粒及菌液和详尽的项目报告。
应用案例分享
双荧光素酶系统可用于验证转录因子与启动子区的调控作用。转录因子作为基因转录的重要调节因子,其DNA结合结构域能够识别特定的碱基序列,实现对该基因转录的激活或抑制。
操作流程
- 启动子报告基因载体构建:将目的基因构建至双荧光素酶报告基因载体的上游,例如pGL3-basic。
- 转染细胞:将荧光素酶报告质粒与内参质粒共同转染目标细胞,报告质粒与内参质粒的转染比例通常为10:1。
- 收集细胞:将裂解液加入细胞孔中,在适当条件下震荡后进行离心,转移上清至新管中。
- 双荧光素酶报告基因活性检测:在96孔酶标版中添加细胞裂解液,随后加入萤火虫荧光素酶反应液和海肾荧光素酶反应液,进行活性检测。
- 数据处理:计算Firefly luciferase与Renilla luciferase的比值,以获取不同处理组的相对luciferase活性。
预期结果分析
- 转录因子促进靶基因启动子区转录活性。
- 转录因子抑制靶基因启动子区转录活性。
服务内容与优惠
立即预约,享受新客户专属优惠!即日起至2025年3月31日,首单客户可享受九折优惠,并免费获得实验方案设计服务!无论您是进行基础研究还是药物开发,泛亚电竞的双荧光素酶报告基因检测服务都将是您探索基因调控机制的强力工具。
相关产品清单
产品类别:双荧光素酶报告基因检测试剂
产品名称:Dual Luciferase Reporter Gene Assay Kit
产品货号:11402ES60/80
产品规格:100T/1000T